摘   要：奶牛乳房炎是由病原微生物感染引起并以奶牛乳房發(fā)生炎癥變化為主的一種疾病。本文通過采集嘉立荷牧場奶樣進(jìn)行乳房炎病原菌檢測，依據(jù)檢測結(jié)果建立了針對(duì)性的治療及預(yù)防方案，為降低乳房炎發(fā)病率提供保障。
關(guān)鍵詞：奶牛；乳房炎；病原菌
奶牛乳房炎是世界上奶牛較常見也是造成經(jīng)濟(jì)損失較大的一種疾病，主要致病因素是細(xì)菌和其他微生物感染。因此，如何及時(shí)、準(zhǔn)確的了解感染原因，據(jù)此做出合理治療和預(yù)防是提高治愈率和降低發(fā)病率的有效手段。但傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)法鑒別種類少、耗時(shí)長、專業(yè)性強(qiáng)嚴(yán)重制約其在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用。
近年來，隨著分子生物學(xué)技術(shù)在畜牧的應(yīng)用日趨成熟，生物芯片和LAMP有機(jī)結(jié)合的基因芯片技術(shù)有效的解決了這一難題。
本文結(jié)合奶牛場體細(xì)胞和隱性乳房炎的評(píng)定數(shù)據(jù)，利用基因芯片技術(shù)提高奶牛乳房炎的檢測效率的優(yōu)勢設(shè)定乳房炎管理目標(biāo)，針對(duì)性建立奶牛乳房健康評(píng)估體系，為降低乳房炎發(fā)病率提供保障。
1   材料與方法
1.1   樣品來源
健康上市奶樣品（大罐奶樣品）每月2次，每月檢測28例；
臨床型乳房炎或含有臨床型乳房炎牛只的混合奶樣品（小罐奶樣品）每月2次，共計(jì)28例；
乳房炎牛的單個(gè)樣品（個(gè)體樣品），每個(gè)奶牛場3-5個(gè)，約60例。
1.2   樣品收集
奶樣采集前應(yīng)選用無菌、干凈、密封的采血管、非抗凝離心管或純凈水瓶（使用前將水倒掉），采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照擠奶程序，采集棄掉前三把奶后的乳汁3ml；自然脫杯后再采集3ml乳汁，與前者混合，采集好的牛奶樣品加入1-2滴重鉻酸鉀溶液，冰箱冷藏保存較多20天。
1.3   檢測方法
使用奶牛乳房炎病原體檢測試劑盒，采用恒溫?cái)U(kuò)增微流控分析儀進(jìn)行檢測。
2   結(jié)果與分析
嘉立荷牧場引起乳房炎發(fā)病的致病菌情況如圖所示，結(jié)果顯示：上市奶樣中引起乳房炎的主要致病菌為乳房鏈球菌、無乳鏈球菌及牛棒狀桿菌，臨床奶樣中引起乳房炎的主要致病菌是支原體、牛棒狀桿菌及無乳鏈球菌。
針對(duì)常見引起奶牛乳房炎的16種致病微生物建立了3套有針對(duì)性的治療和預(yù)防方案。
方案一：革蘭氏陽性菌高效抗生素治療方案，根據(jù)基因芯片鑒定結(jié)果，選擇高效的抗生素加以治療，可以使患病牛只較短時(shí)間達(dá)到細(xì)菌學(xué)治愈，減少了短期內(nèi)復(fù)發(fā)情況的發(fā)生。
方案二：革蘭氏陰性菌非抗生素治療方案，針對(duì)鑒定結(jié)果為革蘭氏陰性菌的乳房炎病例，治療過程中不使用任何抗生素僅采用抗炎等支持療法即可治愈，不采用抗生素治療，既減低了治療過程中的治療費(fèi)用又降低了耐藥菌株的產(chǎn)生。
方案三：金黃色葡萄球菌和支原體的淘汰凈化方案。鑒定為金黃色葡萄球菌和支原體的乳房炎病例一律淘汰，既節(jié)省了治療費(fèi)用又避免了牛群中傳染源的存在。
3   討論
大罐奶檢測結(jié)果結(jié)合奶牛場體細(xì)胞水平和乳房炎發(fā)病率，可以宏觀上評(píng)估整個(gè)泌乳牛群的乳房健康狀況和潛在風(fēng)險(xiǎn)因素：連續(xù)3個(gè)月，體細(xì)胞數(shù)較高，大罐奶檢測到支原體的存在，且臨床型乳房炎以支原體為主導(dǎo)，需要對(duì)泌乳牛群做支原體排查、凈化。如果檢測到其他類型的細(xì)菌存在，且引起臨床型乳房炎的細(xì)菌類型以該大罐奶檢測到的細(xì)菌一致，同時(shí)結(jié)合乳房炎發(fā)病率對(duì)擠奶環(huán)節(jié)或者環(huán)境衛(wèi)生情況等作出評(píng)估。
小罐奶的檢測結(jié)果能有效判斷出一段時(shí)間內(nèi)引起該奶牛場臨床乳房的主導(dǎo)細(xì)菌，找到致病因素。對(duì)整個(gè)泌乳牛群感染風(fēng)險(xiǎn)起到向?qū)ё饔?；找到引起乳房炎發(fā)病的主要致病菌并分析原因。
個(gè)體樣品能直觀體現(xiàn)每個(gè)奶牛個(gè)體的致病菌，3-5個(gè)個(gè)體樣品的檢測結(jié)果對(duì)比與小罐奶和大罐奶以及體細(xì)胞和發(fā)病率的有機(jī)結(jié)合能夠全面的評(píng)估整個(gè)泌乳牛群的乳房健康狀況和潛在風(fēng)險(xiǎn)因素。同時(shí)，個(gè)提樣品檢測結(jié)果在一定程度上對(duì)于治療有一定的指導(dǎo)意義。
目前，基因芯片技術(shù)的應(yīng)用，顯著提高了奶牛乳房炎的檢測效率優(yōu)勢。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法相比基因芯片技術(shù)鑒定病原菌時(shí)間顯著縮短，由原來的24-72h縮短到1h，短時(shí)間之內(nèi)提供較佳的治療方案，顯著提高治愈率，特別是革蘭氏陽性菌群，治愈率可以接近90%。另一方面基因芯片檢測技術(shù)包含16種常乳房炎致病菌，與傳統(tǒng)方法的3-4種相比優(yōu)勢非常明顯。